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低拘束力の低いピペットのヒントの使用における一般的な誤解を避ける方法は?

低バインディングピペットのヒント 疎水性の内部表面設計により、サンプル残留物を大幅に減らすことができ、特に高価な試薬、粘性液体、または微量サンプル(タンパク質や核酸など)を処理するのに適しています。ただし、適切に動作していない場合でも、実験の精度と再現性に影響を与える可能性があります。以下は、実験室の操作仕様と組み合わせて使用​​されている一般的なエラーとソリューションの分析です。

誤解1:先端の事前リンシングを無視します

間違った操作:サンプルを直接吸引し、事前リンシングステップを省略します。

影響:低結合ピペットの先端は残留物を減らすことができますが、血清、タンパク質、有機溶媒などのサンプルの場合、それらの内壁は、表面張力のために微液体膜を形成し、初期ピペッティング量が少なくなる可能性があります。

正しいアプローチ:正式なピペッティングの前に、同じサンプルで吸引液を2〜3回繰り返して、先端の内壁に安定した液体膜層を形成します(高温/低温液体を除く)。

誤解2:吸引速度が速すぎるか、角度が傾いている

間違った操作:液体を素早く吸引するか、ピペットが20°以上傾いています。
インパクト:

ピペットが速すぎる:泡または腰の吸引(液体がピペットに突入し、ピストンを汚染します)。
ピペットチルト:液体表面圧力を変化させ、不正確なピペッティング容積と残留体積の増加をもたらします。正しいアプローチ:
ピペットをゆっくりとゆっくりと放出します。一定の速度で動作し、ピストンリリース速度を制御します。
垂直に保持します:ピペットの先端が液体の表面に浸されたら、傾斜角度≤20°を保ちます。
誤解3:粘性液体の運用上の違いを無視します
間違った動作:高粘度サンプル(グリセロール懸濁液など)には、通常の液体と同じピペッティング速度を使用します。
衝撃:粘性液体はピペット先端の内壁にゆっくりと流れ、急速な放電は残留体積の大幅な増加を引き起こし、低吸着設計の利点を相殺します。
正しいアプローチ:

浸漬時間を延長する:吸引後、吸引後1秒間液体表面にとどまり、1秒間一時停止してから、2番目のギアを押して放電時に液体を吹きます。
ワイドマウスピペットのヒントを選択します:高分子または細胞サンプルの場合、マウスの広い低吸着ピペットチップ(標準の開口部よりも70%大きい)を使用してせん断力を減らします。
誤解4:ヒントをインストールするときに激しく打つ
間違った操作:ピペットハンドルを繰り返し押して、先端を「締め」ます。
効果:長期的な衝撃は、ピペットシーリングコンポーネントを装着し、気密性を破壊し、漏れまたはボリュームエラーを引き起こします。
正しい方法:ピペットを先端に垂直に挿入し、軽く押して、左右にわずかに回転します。

誤解5:誤ったストレージまたは再利用
間違った操作:

先端に残留液があるときにピペットを平らに置きます。
コストを節約するための使い捨ての低吸収のヒントを再利用します。インパクト:
平らにすると、液体の逆流がピストンスプリングを腐食させます。
再利用は、相互汚染または構造変形のために精度に影響を与える可能性があります。正しい方法:
ピペッティングの直後に先端を捨て、ピペットを垂直に吊るします。
特にPCRや同位体などの敏感な実験に関しては、再利用は厳密に禁止されています。
専門的なアドバイス:低保持のヒントの利点を最大化します
液体の特性を一致させます:
揮発性液体(クロロホルムなど):通常の低保持のヒントを使用しないようにし、揮発性試薬向けに設計された溶媒セーフのヒントまたは外部ピストンピペットを使用しないでください。
キャリブレーション検証:
実際のボリュームが標準を満たしているかどうかを確認するために、分析バランス(20°で1ml = 0.9982g)でピペットされた純水の重量を定期的に計量します。
キーポイントの概要:低保持のヒントは、サンプルの損失を減らすことで精度を向上させますが、操作の詳細が無視されている場合でも逆効果になる可能性があります。標準化された設置、速度制御、サンプル特性への適応、および1回限りの使用は、高い再現性実験を達成するための基礎です。